تهیه و ارزیابی آنتی بادی ضد igg گاو با استفاده از پروتئین نوترکیب ناحیه ثابت زنجیر سنگین igg گاو

anti-bovine (پادتن ضد پادتن گاو) در آزمایش های سرمی کاربرد زیادی دارد که برای تهیه آن به طور معمول پادتن خالص شده گاو به گونه دیگری(گوسفند، خرگوش و غیره) تزریق می گردد. در این مطالعه تلاش گردید با تغییر میزبان، طول زمان و درجه حرارت کشت، بهترین شرایط بیان پروتئین نوترکیب ناحیه ثابت زنجیر سنگین igg گاو برآورد گردد، سپس پروتئین فیوژن تولید شده در شرایط بهینه با استفاده از روش کروماتوگرافی خالص سازی شد و پس از تعیین غلظت، جهت ایمن سازی و تولید آنتی بادی ضد igg گاو به موش تزریق گردید. به این منظور، پنج سر موش balb/c ماده 6 هفته هر یک با استفاده از 50 میکروگرم از پروتئین، همراه با ادجوانت فروند به صورت داخل صفاقی ایمن شدند. ایمن سازی در سه نوبت و با فاصله 3 هفته تکرار شد. در هر یک از زمان های تزریق و یک هفته پس از آخرین تزریق، سرم موش ها جمع آوری گردید. در پایان سرم موش های ایمن شده از نظر آنتی بادی ضد igg گاو با آزمایش های ایمونودات و ایمونوبلات و با استفاده از یک کنژوگه پراکسیداز anti-mouse مورد بررسی قرار گرقتند. نتایج آزمایش های ایمونودات و ایمونوبلات بر روی سرم موش های ایمن شده با این پروتئین نشان داد که این پروتئین به خوبی قادر به تحریک سیستم ایمنی جهت تولید آنتی بادی ضد igg گاو می-باشد و می توان از آن جهت تهیه anti-bovine استفاده نمود.